華南農(nóng)業(yè)大學園藝學院聯(lián)合北京大學現(xiàn)代農(nóng)業(yè)研究院等單位揭示“辣椒為什么那樣紅?”
2023年10月12日來源:華南農(nóng)業(yè)大學
近日,華南農(nóng)業(yè)大學園藝學院聯(lián)合北京大學現(xiàn)代農(nóng)業(yè)研究院等單位在辣椒紅素生物合成的轉(zhuǎn)錄調(diào)控中取得新進展。相關(guān)成果以“An R-R-type MYB transcription factor promotes nonclimacteric pepper fruit carotenoid pigment biosynthesis”為題發(fā)表在國際著名學術(shù)期刊Plant Journal(中科院一區(qū),五年影響因子:8.02,論文鏈接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/tpj.16257)。
成熟果實色澤決定果實外觀和營養(yǎng)品質(zhì),影響消費者偏好。根據(jù)果實成熟期間呼吸及乙烯釋放高峰的有無,果實一般可以分為呼吸躍變型果實(climacteric fruit,如番茄、蘋果、和香蕉等)和非呼吸躍變型果實(non-climacteric fruit,如辣椒、葡萄、草莓和柑橘)?;谝蚁┦荏w和信號轉(zhuǎn)導的分子機制,呼吸躍變型果實番茄成熟過程中類胡蘿卜素生物合成調(diào)控的分子機理已研究非常清楚。脫落酸(ABA)被認為是啟動非呼吸躍變型果實成熟的關(guān)鍵激素,而其這在類果實成熟過程中介導類胡蘿卜素生物合成調(diào)控的分子機制卻仍然不明確。
辣椒(Capsicum)是我國重要的蔬菜和調(diào)料作物,是典型的非呼吸躍變型果實。辣椒紅素是辣椒成熟果實特異高度積累的一種類胡蘿卜素,賦予成熟果實紅色,決定果實外觀和營養(yǎng)品質(zhì)。同時,辣椒紅素作為脂溶性天然色素,由于具有優(yōu)異的抗氧化等生物活性和極高色價(色價E值即460nm處的吸光值)的特點,被作為重要的工業(yè)原料廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化妝品(高端口紅、美妝)及飼料添加劑等領(lǐng)域。在食品添加劑領(lǐng)域,辣椒紅素憑借色價高、著色力強、保色效果好和安全性高等優(yōu)點被聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織(FAO)和世界衛(wèi)生組織(WHO)列為A類色素(即在使用中可以不限量添加)。目前,全球辣椒紅素市場規(guī)模達數(shù)十億元,且以每年15%復合增長率增加。辣椒紅素提取上游主要為辣椒原材料和生產(chǎn)檢驗設(shè)備,其中辣椒原材料質(zhì)量直接影響辣椒紅素提取行業(yè)發(fā)展,上游成本的結(jié)構(gòu)中辣椒原材料成本占比超過90%,選育高產(chǎn)、多抗、高辣椒紅素的辣椒品種是加工提取的關(guān)鍵。辣椒紅素主要在辣椒果實轉(zhuǎn)色期至成熟期合成,其合成基因PSY(八氫番茄紅素合成酶),PDS(八氫番茄紅素脫氫酶),β-CH(β-胡蘿卜素羥化酶)和CCS(辣椒紅素-辣椒玉紅素合成酶)在轉(zhuǎn)錄水平層面控制辣椒紅素含量,但是其合成的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制尚不清楚。因此,研究辣椒紅素生物合成的分子遺傳機制,為創(chuàng)制高辣椒紅素辣椒新種質(zhì)奠定基礎(chǔ)。
本研究通過對辣椒不同發(fā)育階段果實的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)構(gòu)建加權(quán)基因共表達網(wǎng)絡(luò)(WGCNA),鑒定到辣椒紅素合成模塊(MEdarkgreen)。在該模塊中,包含編碼辣椒紅素合成酶(capsanthin-capsorubin synthase,CCS)基因及一個功能未知且和CCS表達高度相關(guān)的R-R型MYB轉(zhuǎn)錄因子DIVARICATA1。功能表征發(fā)現(xiàn)DIVARICATA1編碼一個核定位的轉(zhuǎn)錄激活因子,沉默DIVARICATA1顯著降低了辣椒紅素合成相關(guān)基因PSY,PDS,β-CH1和CCS的轉(zhuǎn)錄,對應(yīng)的辣椒紅素含量也顯著降低。進一步實驗證明了DIVARICATA1直接結(jié)合并調(diào)控辣椒紅素合成基因CCS的表達。通過分析辣椒紅素含量不同的辣椒種質(zhì)資源發(fā)現(xiàn),DIVARICATA1轉(zhuǎn)錄水平和辣椒紅素含量顯著正相關(guān)。
為了進一步探索ABA在辣椒果實成熟過程中的作用,采用ABA處理綠熟期辣椒果實可以顯著促進DIVARICATA1和辣椒紅素合成基因(CBG)表達,對應(yīng)的辣椒紅素的含量也顯著上升。沉默DIVARICATA1顯著降低了ABA介導的辣椒紅素合成基因(CBG)表達和辣椒紅素的積累,表明在ABA介導非呼吸躍變型辣椒果實成熟過程中,類胡蘿卜素合成依賴于DIVARICATA1。
辣椒基因組測序表明,辣椒紅素合成通路基因在茄科植物辣椒、番茄、茄子、馬鈴薯、煙草等植物中都存在,比較轉(zhuǎn)錄組學發(fā)現(xiàn)其關(guān)鍵基因特異在辣椒果實中轉(zhuǎn)錄是辣椒積累辣椒紅素的原因。為了進一步明確辣椒紅素生物合成的轉(zhuǎn)錄調(diào)控進化機制,本研究分析了辣椒、番茄、茄子、馬鈴薯等茄科所有已明確參與果實成熟和類胡蘿卜素生物合成的轉(zhuǎn)錄因子和合成基因。結(jié)果表明,類胡蘿卜素上游合成基因PSY、PDS和成熟核心調(diào)控基因MADS-RIN轉(zhuǎn)錄模式在茄科果實成熟過程中相對保守。然而,類胡蘿卜素下游合成基因β-CH、CCS和DIVARICATA1特異在辣椒果實中獲得高水平轉(zhuǎn)錄,表明它們功能茄科中出現(xiàn)了差異進化。進一步分析表明,辣椒中DIVARICATA1可以被MADS-RIN調(diào)控,表明MADS-RIN-DIVARICATA1模塊參與辣椒果實成熟過程中類胡蘿卜素的生物合成。該研究首次鑒定到了辣椒紅素生物合成的關(guān)鍵調(diào)控基因,明確了ABA信號介導非呼吸躍變型辣椒果實類胡蘿卜素生物合成的機制,并且發(fā)現(xiàn)了辣椒紅素在茄科的生物合成差異調(diào)控的進化機制,為辣椒色澤遺傳改良奠定了基礎(chǔ)。
據(jù)悉,目前園藝學院辣椒課題組已經(jīng)從世界范圍內(nèi)收集3200余份遺傳多樣性極為廣泛的辣椒種質(zhì)資源,這些材料為辣椒重要農(nóng)藝性狀、風味色澤代謝品質(zhì)和雜種優(yōu)勢形成機理的研究以及分子設(shè)計育種提供了重要的支撐。
華南農(nóng)業(yè)大學博士后宋佳麗和孫彬妹副教授為該論文第一作者,朱張生、雷建軍教授為該論文通訊作者。陳長明、陳國菊、曹必好等教授也參與了該研究。研究得到了國家自然科學基金(32102380, U21A20230, 32070331和32072580)、廣東省基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究基金(2022A1515012547)、廣州市基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究基金(2023A04J0115)、廣東省農(nóng)業(yè)廳(2022-NPY-00-024)和華南農(nóng)業(yè)大學提質(zhì)增效項目的資助。
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