摘要：為了觀察黑洋蔥多糖與二甲雙胍對(duì)二型糖尿病大鼠的降血糖效果。首先用洋蔥發(fā)酵成黑洋蔥，比較黑洋蔥和洋蔥差別，提取黑洋蔥多糖，用四氧嘧啶誘發(fā)高血糖大鼠為二型糖尿病模型，用二甲雙胍混懸液對(duì)高血糖大鼠連續(xù)灌胃28天，觀察糖尿病大鼠的血糖值，再與黑洋蔥多糖對(duì)高血糖大鼠連續(xù)灌胃28天，觀察糖尿病大鼠的血糖值并進(jìn)行比較。結(jié)果：黑洋蔥多糖對(duì)四氧嘧啶誘發(fā)的高血糖大鼠降血糖作用更明顯。黑洋蔥多糖可以抑制血糖升高，降血糖作用顯著，效果更好。

　　黑洋蔥是用新鮮洋蔥放置在恒溫恒濕發(fā)酵箱中，經(jīng)過(guò)一定溫度和濕度調(diào)控后，添加EM菌，發(fā)酵一個(gè)月后，發(fā)生美拉德反應(yīng)[1]，而制成的一種黑洋蔥食品。與洋蔥相比，黑洋蔥的有效成分很明顯提高，且味道酸甜、不上火，是天然健康保健食品[2]。黑洋蔥多糖是黑洋蔥中的有效活性成分之一，具有降血糖等作用[3]。

　　二甲雙胍屬于雙胍類(lèi)化合物，自1957年問(wèn)世以來(lái)已經(jīng)歷了近60年，其良好的安全性，成為目前2型糖尿病的一線用藥[9，10]。二甲雙胍可以通過(guò)提高胰島素的敏感性，改善胰島素抵抗，減少肝臟葡萄糖輸出等功效降低血糖。胃腸道反應(yīng)是二甲雙胍主要的不良反應(yīng)，而乳酸酸中毒則非常罕見(jiàn)，所以能安全地用于糖尿病前期預(yù)防與糖尿病的治療[4]。

　　本文研究二甲雙胍對(duì)糖尿病大鼠的降血糖效果，再與黑洋蔥多糖對(duì)糖尿病大鼠的降血糖效果[3]進(jìn)行比較，驗(yàn)證黑洋蔥多糖的降血糖功效。為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)黑洋蔥降血糖的保健品和藥品提供理論依據(jù)。

　　1 材料與方法

　　SD大鼠（體重180～220g，雄性），購(gòu)自內(nèi)蒙古大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部；鹽酸二甲雙胍緩釋片，購(gòu)自青島黃海制藥有限責(zé)任公司；生理鹽水，購(gòu)自石家莊鵬海制藥有限公司；四氧嘧啶啶，購(gòu)自中科瑞泰生物科技有限公司。

研缽、藥匙、容量瓶、燒杯、玻璃棒，包頭廣源化工有限公司；JA5003 型分析天平、FA5003 電子天平，上海越平科學(xué)儀器有限公司；1.5mL、2.5mL注射器，洪大醫(yī)療器械有限公司；GA-3型血糖儀、血糖試條，三諾生物傳感股份有限公司；12號(hào)灌胃針頭，上海波利鴿工貿(mào)有限公司。

　　1.2 方法

　　1.2.1 黑洋蔥與洋蔥樣品營(yíng)養(yǎng)成分分析

　　對(duì)于新鮮紫皮洋蔥相關(guān)的研究資料很多，其中水分含量最多，通過(guò)美拉德發(fā)酵反應(yīng)制得的成品黑洋蔥，黑洋蔥中水分的含量大大降低，與干燥洋蔥樣品中的營(yíng)養(yǎng)成分作對(duì)比。

　　1.2.2 礦物質(zhì)種類(lèi)及含量的分析

　　礦物質(zhì)含量的研究，對(duì)分析食品很重要，人體需要礦物質(zhì)元素的攝取，都是不可缺少的元素。本實(shí)驗(yàn)采用IPC-MS法測(cè)定鉀、鈣、鈉、鎂、鐵、銅、的含量，測(cè)定條件：射頻功率，1.6KW；射頻匹配，1.7V；載氣（氬氣）0.77L/min，補(bǔ)充氣體0.45L/min，測(cè)量高度10mm。

　　1.2.3 氨基酸種類(lèi)及含量的測(cè)定

　　按照國(guó)標(biāo)氨基酸的測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定氨基酸的種類(lèi)及含量。

　　1.2.4 建立高血糖大鼠模型

　　建立黑洋蔥多糖實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組模型，將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分成2組，分別是對(duì)照組大鼠（10只）、實(shí)驗(yàn)組大鼠（20只）。實(shí)驗(yàn)組大鼠在禁食不禁水12h的情況下，30s內(nèi)完成腹腔注射四氧嘧啶200mg/kg，對(duì)照組大鼠腹腔注生理鹽水[5，6]。大鼠注射藥物72h后禁食12h，在大鼠尾部采血，血糖濃度大于7.0mmol/L判定為建模成功[7]。高血糖組大鼠，平均血糖值32.00mmol/L、中高血糖組大鼠，平均血糖值16.31mmol/L，并稱量體重。

　　同理二甲雙胍實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組建模也分成兩組，對(duì)照組大鼠10只、實(shí)驗(yàn)組大鼠20只。實(shí)驗(yàn)組在禁食不禁水12h的情況下，一次性30秒內(nèi)完成腹腔注射四氧嘧啶200mg/kg，對(duì)照組大鼠腹腔注射生理鹽水。注射藥物72h后，禁食12h，在大白鼠尾部取血，當(dāng)血糖濃度大于7.0mmol/L的大鼠設(shè)定為高血糖大鼠建模成功，血糖值平均31.98mmol/L設(shè)定為高血糖大鼠、血糖值平均16.18mmol/L設(shè)定中高血糖值組，并稱量體重。

　　1.2.5 二甲雙胍對(duì)大鼠降血糖實(shí)驗(yàn)

　　鹽酸二甲雙胍緩釋片臨用時(shí)以蒸餾水配制成混懸液。

　　二甲雙胍試驗(yàn)組和對(duì)照組按0.19g/kg給藥量連續(xù)灌胃28d，分別在第7d，14d，21d，28d禁食不禁水12h后，尾部采血，測(cè)定血糖值。

　　1.2.6 黑洋蔥多糖對(duì)大鼠降血糖實(shí)驗(yàn)

　　黑洋蔥多糖實(shí)驗(yàn)組按400mg/kg給藥量連續(xù)灌胃28d，分別在第7d，14d，21d，28d禁食不禁水12h后，大鼠尾部采血，測(cè)定大鼠血糖值。

　　1.2.7 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)與分析

　　采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析[8]。

　　2 結(jié)果

　　2.1 黑洋蔥與洋蔥樣品營(yíng)養(yǎng)成分分析

通過(guò)軟件分析兩種洋蔥營(yíng)養(yǎng)成分的顯著性差異，黑洋蔥中水分12.06％，洋蔥樣品中水分13.31％，黑洋蔥中蛋白質(zhì)含量14.65％，洋蔥樣品蛋白質(zhì)含量12.81％，經(jīng)分析兩種洋蔥的蛋白質(zhì)含量具有顯著差異。黑洋蔥中蛋白質(zhì)含量高，其他營(yíng)養(yǎng)成分均有不同程度的差異，具體差異如下表2.1：

表2.1 黑洋蔥與洋蔥樣品的營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)比

Table 2.1 Comparison of Nutrients between Black Onion

and Onion Samples

注：該表數(shù)據(jù)為平均值±，標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=3），經(jīng)過(guò)軟件分析P<0.05存在顯著差異的營(yíng)養(yǎng)成分有水分，蛋白質(zhì)，粗纖維，灰分。

　　2.2 礦物質(zhì)種類(lèi)及含量的分析

　　實(shí)驗(yàn)采用IPC-MS法測(cè)定鉀、鈣、鈉、鎂、鐵、銅、的含量，測(cè)定條件：射頻功率，1.6KW；射頻匹配，1.7V；載氣（氬氣）0.77L/min，補(bǔ)充氣體0.45L/min，測(cè)量高度10mm。結(jié)果如下表2.2：

表2.2 黑洋蔥與洋蔥樣品礦物質(zhì)含量表（mg/100g）

Table 2.2 Mineral content of black onion and onion samples

(mg/100g)

　　2.3 氨基酸種類(lèi)及含量的測(cè)定

　　按照國(guó)標(biāo)氨基酸的測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定氨基酸的種類(lèi)及含量，結(jié)果如下表2.3：

表2.3 氨基酸含量對(duì)比表（mg/100mg）

Table 2.3 Comparison of amino acids content (mg/100mg)

　　2.4 黑洋蔥多糖對(duì)四氧嘧啶誘發(fā)大鼠糖尿病的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下表2.4：

表2.4 黑洋蔥多糖對(duì)大鼠的降血糖作用

Table 2.4 hypoglycemic effect of black onion

polysaccharides in rats

注: 與灌胃前相比較，數(shù)據(jù)的上標(biāo)**表示數(shù)據(jù)的差異極顯著( P＜0.01)。

　　采用SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析，與灌胃前大鼠相比，灌胃后大鼠高血糖值組、中高血糖值組大鼠平均血糖濃度均極顯著降低 （P＜0.01），血糖值下降率分別為69.16％和54.69％，說(shuō)明黑洋蔥多糖對(duì)大鼠降血糖效果明顯。

　　2.5 二甲雙胍對(duì)四氧嘧啶誘發(fā)大鼠糖尿病的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下表2.5：

表2.5 二甲雙胍對(duì)大鼠降血糖作用

Table 2.5 Effects of metformin on hypoglycemia in rats

注: 與灌胃前相比較，數(shù)據(jù)的上標(biāo)**表示數(shù)據(jù)的差異極顯著( P＜0.01)。

　　采用SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析，與灌胃前大鼠相比，灌胃后大鼠高血糖值組、中高血糖值組大鼠平均血糖濃度顯著降低（P＜0.01），血糖下降分別為50.28％和22.56％，高血糖值組和中血糖值組血糖濃度雖有顯著下降，只是在第一周下降，并且不能降到正常值。

　　2.6 黑洋蔥多糖與二甲雙胍對(duì)大鼠降血糖比較

　　由表2.6所見(jiàn)，高血糖值組，用黑洋蔥多糖灌胃血糖下降率69.16％，用二甲雙胍灌胃血糖下降率50.28％。中高血糖值組，用黑洋蔥多糖灌胃血糖下降率54.69％，用二甲雙胍灌胃血糖下降率2.56％。黑洋蔥降血糖效果更好。

表2.6 黑洋蔥多糖與二甲雙胍對(duì)大鼠降血糖比較

Table 2.6 Comparison of black onion polysaccharide and

metformin on hypoglycemia in rats

　　3 討論

　　經(jīng)分析黑洋蔥黑和洋蔥的蛋白質(zhì)含量具有顯著差異。黑洋蔥中蛋白質(zhì)含量高，黑洋蔥中甘氨酸、異亮氨酸含量高于洋蔥，黑洋蔥抗氧化優(yōu)于洋蔥，黑洋蔥有較好降血糖效果[3]，二甲雙胍灌胃雖然進(jìn)行了28天的實(shí)驗(yàn)，但是只有第一周血糖有明顯的下降，后面三周基本維持在同一水平，說(shuō)明二甲雙胍不能使高血糖值降到正常水平。與二甲雙胍相比，黑洋蔥多糖對(duì)大鼠的降血糖效果更好，說(shuō)明黑洋蔥多糖能治療四氧嘧啶導(dǎo)致胰島細(xì)胞的損傷，并且還可以恢復(fù)胰島細(xì)胞的功能，降血糖的效果更明顯，為何黑洋蔥多糖比二甲雙胍對(duì)大鼠降血糖明顯需要做機(jī)理方面研究。

　　4 結(jié)論

　　黑洋蔥多糖對(duì)四氧嘧啶誘發(fā)的高血糖大鼠降血糖作用比二甲雙胍對(duì)大鼠降血糖明顯，黑洋蔥多糖可以抑制血糖升高，降血糖作用顯著，效果更好。（李躍華 周寧 云月英 寧月寶［通訊作者］內(nèi)蒙古科技大學(xué) 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院）

參考文獻(xiàn)：

[1]寧月寶、汪芳芳、杜志強(qiáng)等。固態(tài)發(fā)酵黑洋蔥揮發(fā)性物質(zhì)的GC-MS測(cè)定[J]. 食品研究與開(kāi)發(fā)，2014，(21)：93-96。

[2]祝炳俏、吳海歌、劉媛媛等。黑蒜抗氧化活性研究[J]. 食品研究與開(kāi)發(fā)，2008，(10)：58-60。

[3]寧月寶、呂丹、張鵬翔、孫旭東。黑洋蔥粗多糖的提取及降血糖作用研究[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī)，2016(14)：182-183。

[4]陳歡歡、劉超。二甲雙胍50年進(jìn)程[J]. 國(guó)際內(nèi)科學(xué)雜志，2008，(10)：573-577。

[5]薛峰。四氧嘧啶誘導(dǎo)糖尿病小鼠機(jī)理的研究[D]. 延吉：延邊大學(xué)，2007。

[6]楊潤(rùn)軍、李青旺、趙蕊。四氧嘧啶與鏈脲佐菌素誘導(dǎo)小鼠糖尿病模型的效果比較[J]. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)；自然科學(xué)版，2006，（2)：17-20。

[7]李鳳林、余蕾。玉米須黃酮的提取及其降糖作用[J]. 中國(guó)食品添加劑，2009，(3)：121-124。

[8]李鳳林、余蕾。馬齒莧多糖降血糖與血脂作用研究[J]. 中國(guó)食品添加劑，2011，(1)：64-68。

[9]王荔、張汝、侯凱文。二甲雙胍在炎性衰老中的作用機(jī)制[J]. 老年醫(yī)學(xué)與保健，2018，24，(06)：737-740。

[10]張偉華。二甲雙胍與鈣劑聯(lián)合用藥對(duì)老年2型糖尿病患者骨代謝的影響[J]. 黑龍江醫(yī)藥，2018,31，(06)：1283-1285。